Bestimmung von Maltose und Maltotriosee, mittels Enzymatik
Geeignet für Würze, Bier, Malzgetränke, Nährbier, Biermischgetränke, AFG, Säfte und Getränke
Maltose ist Hauptbestandteil der Bierwürze bzw. des Würzeextraktes.
Maltose und Saccharose werden durch das Enzym α-Glucosidase (Maltase) bei pH 6,6 in zwei Moleküle D-Glucose bzw. in D-Glucose und D-Fructose gespalten:
Die gebildete D-Glucose wird durch das Enzym Hexokinase (HK) und Adenosin-5’-triphosphat (ATP) zu Glucose-6-phosphat (G-6-P) phosphoryliert:
In Gegenwart des Enzymes Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6P-DH) wird G-6-P von Nicotinamid-Adenin-Dinucleotidphosphat (NADP) zu Gluconat-6-phosphat oxidiert. Es entsteht reduziertes Nicotinamid-Adenin-Dinucleotidphosphat (NADPH):
Die während der Reaktion gebildete NADPH-Menge ist der Glucosemenge äquivalent. NADPH ist Messgröße und wird aufgrund seiner Absorption bei 334, 340 oder 365 nm bestimmt.
Das Enzym α-Glucosidase ist gruppenspezifisch, d. h. die Spezifität ist auf die Art der glucosidischen Bindung gerichtet.
Es werden nur α-1,4-Bindungen, also neben Maltose auch Saccharose und Maltotriose, nicht jedoch Maltotetraose, unter den gegebenen Bedingungen gespalten. Bei der Maltoseberechnung muss deshalb der Saccharosegehalt berücksichtigt werden (Der Maltose-Ansatz erfasst die aus Maltose und Saccharose gebildete Glucose und die freie Glucose, der Saccharoseansatz erfasst die aus Saccharose gebildete Glucose und die freie Glucose).
Bestimmung des Gehaltes an zugesetzter Pantothensäure mittels mikrobiologischem Mikrotiterplattentest
Geeignet für AFG, Säfte, Lebensmittel
Der VitaFast® Pantothensäure Mikrotiterplattentest ist ein mikrobiologisches Verfahren zur Bestimmung des Gehalts an Pantothensäure in Lebensmitteln und Getränken. Zur Bestimmung der zugesetzten Pantothensäure wird das Getränk steril filtriert und mit sterilem Wasser aus dem Testkit verdünnt.
Zur Bestimmung des Gesamtgehalts an Pantothensäure (natürliches und zugesetztes) muss die Probe durch eine enzymatische Hydrolyse aufgeschlossen werden.
Das Pantothensäure-Assay-Medium und die verdünnte Probe werden in die Kavitäten einer Mikrotiterplatte gegeben, die mit Lactobacillus plantarum beschichtet sind. Lactobacillus plantarum ist auf die Anwesenheit von Pantothensäure angewiesen. Nach Zugabe von Pantothensäure als Standard oder als in einer Probe enthaltenes Vitamin wächst der Keim solange, bis das Vitamin aufgebraucht ist. Die Inkubation erfolgt bei 37 °C für 20–24 h. Das Wachstum von Lactobacillus plantarum in Abhängigkeit vom Pantothensäure wird als Trübung gemessen und mit einer Standardkonzentrationsreihe verglichen. Die Messung erfolgt im Mikrotiterplattenphotometer bei 610‑630 nm (alternativ bei 540‑550 nm).
Anwendbar bei allen (Labor)-Würzen.
Zur Inaktivierung der amylolytischen Enzyme wird die Kongresswürze vorgängig erhitzt und in einem Erlenmeyerkolben nach Zugabe von 7,5 g/100 ml Hefe unter Rühren in ca. 24 h endvergoren. Aus der Differenz des Extraktes vor der Gärung und nach der Gärung wird der Endvergärungsgrad berechnet.
Betriebshefen aus dem Brauereiprozess.
Lebende, atmende Zellen reduzieren das in die Zelle aufgenommene Methylenblau mit Hilfe von Dehydrogenasen zur farblosem Leukoform, sie sind blassblau gefärbt. Toten bzw. inaktiven Zellen fehlt die Dehydrogenase-Aktivität, sie färben sich intensiv blau.
Brauhefen
Untersuchung von Hefen auf tote Zellen mittels Propidiumiodid im Cellcounter.