Bestimmung von Ascorbinsäure mittels iodometrischer Titration
Geeignet für Säfte und AFG
Ascorbinsäure und Reduktone werden iodometrisch titriert.
Bestimmung von Ascorbinsäure mittels Enzymatik
Geeignet für Würze, Biere, Biermischgetränke und AFG
L‑Ascorbinsäure (L‑Ascorbat) sowie weitere reduzierende Substanzen (X‑H2) reduzieren das Tetrazoliumsalz MTT [3-(4,5-Dimethylthiazolyl-2)-2,5- Diphenyltetrazoliumbromid] in Gegenwart des Elektronenüberträgers PMS (5-Methylphenaziniummethosulfat) bei pH = 3,5 zu einem Formazan:
In einem Probenleerwert-Ansatz wird von allen reduzierenden Substanzen nur der L‑Ascorbatanteil in der Probe durch Ascorbatoxidase (AAO) in Gegenwart von Sauerstoff oxidativ entfernt. Dabei entsteht Dehydroascorbat, das mit MTT/PMS nicht reagiert:
Die Extinktionsdifferenz der Probe abzüglich der Extinktionsdifferenz des Probenleerwertes ist der L‑Ascorbatmenge in der Probe äquivalent. Das MTT-Formazan ist Messgröße und wird aufgrund seiner Absorption im sichtbaren Bereich bei 578 nm photometrisch bestimmt.
Bestimmung von Ascorbinsäure mittels HPLC
Geeignet für Biere, Biermischgetränke und AFG
Die Bestimmung der Ascorbinsäure erfolgt mittels HPLC an Umkehrphasen mit wässrigem Fließmittel. Zur Detektion wird ein UV-Detektor bei 260 nm eingesetzt. Die Konzentrationsbestimmung erfolgt über externen Standard.