B-590.50.530 [2020-10] Vitamin B6 – Mikrotiterplattentest

Zahlreiche Getränke, wie z. B. Multivitaminsäfte und Sportlergetränke, werden mit Vitaminen angereichert. Der Zusatz von Vitaminen und deren Auslobung ist nur ab einer sogenannten „signifikanten Menge“ möglich, die in Anhang XIII der LebensmittelinformationsVO 1169/2011 definiert ist. Sie beträgt bei Getränken min. 7,5 %/100 ml bzw. bei Einzelportionspackungen min. 15 %/Portion der Nährwertbezugswerte (NRV=Nutrition refernce values).

Referenzmengen für die tägliche Zufuhr von Vitaminen:

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Aufgabenstellung/Zweck

Bestimmung des Gehaltes an zugesetztem Vitamin B6 mittels mikrobiologischem Mikrotiterplattentest

Anwendungsbereich

Geeignet für AFG, Säfte, Lebensmittel

Prinzip

Der VitaFast® Vitamin B6 (Pyridoxin) Mikrotiterplattentest ist ein mikrobiologisches Verfahren zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B6 in Lebensmitteln und Getränken.
Vitamin B6 wird als Pyridoxinhydrochlorid oder als Pyridoxin-5-phosphat zugesetzt. Da die phosphorylierte Vitamin-B6-Form vom Testkeim nicht erkannt wird, wird das Getränk zur Bestimmung des zugesetzten Vitamin B6 mit saurer Phosphatase behandelt, anschließend heiß extrahiert und falls erforderlich mit sterilem Wasser aus dem Testkit verdünnt.
Zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B6 (natürliches und zugesetztes) muss die Probe durch eine enzymatische Hydrolyse aufgeschlossen werden.

Das Vitamin-B6-Assay-Medium und der verdünnte Extrakt werden in die Kavitäten einer Mikrotiterplatte gegeben, die mit Saccharomyces cerevisiae beschichtet sind. Saccharomyces cerevisiae ist auf die Anwesenheit von Vitamin B6 angewiesen. Nach Zugabe von Vitamin B6 als Standard oder als in einer Probe enthaltenes Vitamin wächst der Keim solange, bis das Vitamin aufgebraucht ist. Die Inkubation erfolgt bei 30 °C für 44‑48 h.
Das Wachstum von Saccharomyces cerevisiae in Abhängigkeit vom Vitamin B6 wird als Trübung gemessen und mit einer Standardkonzentrationsreihe verglichen. Die Messung erfolgt im Mikrotiterplattenphotometer bei 610‑630 nm (alternativ bei 540‑550 nm).

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