B-590.58.112 [2020-10] Glycerin in Getränken – enzymatisch
Aufgabenstellung/Zweck
Bestimmung von Glycerin mittels Enzymatik
Anwendungsbereich
Geeignet für Würze, Biere, Biermischgetränke und alkoholfreie Getränke
Prinzip
Glycerin entsteht während der Gärung. Glycerin wird in der durch Glycerokinase (GK) katalysierten Reaktion mit Adenosin-5'-triphosphat (ATP) zu L‑Glycerin-3-phosphat phosphoryliert:
Mittels Pyruvat-Kinase (PK) wird das entstandene Adenosin-5'-diphosphat (ADP) durch Phosphoenolpyruvat (PEP) unter Bildung von Pyruvat wieder in ATP überführt:
Pyruvat wird durch reduziertes Nicotinamid-adenin-dinucleotid (NADH) in Gegenwart des Enzyms L-Lactat-Dehydrogenase (L-LDH) zu L-Lactat hydriert, wobei NADH zu NAD oxidiert wird:
Die während der Reaktion verbrauchte NADH-Menge ist der Glycerinmenge äquivalent. NADH ist Messgröße und aufgrund seiner Absorption bei 334, 340 oder 365 nm zu bestimmen.