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Vitamin B₆ wird mit Ionenpaar‑RP‑HPLC getrennt und über UV-Absorption detektiert. Die Quantifizierung erfolgt über den Vergleich mit externen Standards. Die Identität der Substanzen kann, falls erforderlich, über einen Spektrenvergleich bestätigt werden.

Zur Analyse von vitaminhaltigen alkoholfreien Getränken werden HPLC-Methoden erfolgreich eingesetzt. Diese lassen sich jedoch meist nicht auf die in Würze- und Biermatrix vorliegenden Konzentrationen übertragen.

Zur Analyse von Vitamin B₁ und B₂ wird ein Reagenzienkit zur Bestimmung der Vitamine B₁ und B₂ in Vollblut der Firma Chromsystems GmbH/München verwendet. Die Applikationen zeichnen sich durch eine einfache Durchführbarkeit sowie einen geringen apparativen Aufwand aus, da ein isokratisches HPLC-System genügt. Die Anwendung der Applikation wurde in Zusammenarbeit mit dieser Firma in Hinsicht auf die veränderte Probenmatrix (Maische, Würze und Bier) modifiziert.

Der VitaFast® Vitamin B₆ (Pyridoxin) Mikrotiterplattentest ist ein mikrobiologisches Verfahren zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B₆ in Lebensmitteln und Getränken.
Vitamin B₆ wird als Pyridoxinhydrochlorid oder als Pyridoxin-5-phosphat zugesetzt. Da die phosphorylierte Vitamin-B₆-Form vom Testkeim nicht erkannt wird, wird das Getränk zur Bestimmung des zugesetzten Vitamin B₆ mit saurer Phosphatase behandelt, anschließend heiß extrahiert und falls erforderlich mit sterilem Wasser aus dem Testkit verdünnt.
Zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B₆ (natürliches und zugesetztes) muss die Probe durch eine enzymatische Hydrolyse aufgeschlossen werden.

Das Vitamin-B₆-Assay-Medium und der verdünnte Extrakt werden in die Kavitäten einer Mikrotiterplatte gegeben, die mit Saccharomyces cerevisiae beschichtet sind. Saccharomyces cerevisiae ist auf die Anwesenheit von Vitamin B₆ angewiesen. Nach Zugabe von Vitamin B₆ als Standard oder als in einer Probe enthaltenes Vitamin wächst der Keim solange, bis das Vitamin aufgebraucht ist. Die Inkubation erfolgt bei 30 °C für 44‑48 h.
Das Wachstum von Saccharomyces cerevisiae in Abhängigkeit vom Vitamin B₆ wird als Trübung gemessen und mit einer Standardkonzentrationsreihe verglichen. Die Messung erfolgt im Mikrotiterplattenphotometer bei 610‑630 nm (alternativ bei 540‑550 nm).

Die Carotinoide werden mit Lösungsmittel extrahiert. Aus dieser Lösung wird der Gesamtcarotinoid-Gehalt photometrisch bestimmt. Nach dem Aufnehmen in Ethanol wird der Gehalt an β-Carotin und α-Carotin mittels HPLC durch Trennung an einer C30-Phase bestimmt. Der Gehalt an Vitamin A wird anschließend berechnet.

Die petroletherlöslichen Carotinoide werden beim Klären mit Carrez-I- und Carrez-II-Lösung quantitativ mit Zinkhexacyanoferrat (II) adsorptiv ausgefällt. Aus dem Niederschlag werden sie mit Aceton herausgelöst und anschließend in Petrolether überführt. Aus dieser Petroletherlösung wird der Gesamtcarotinoid-Gehalt photometrisch bestimmt.

Die Carotinoide der Saftprobe werden mit Carrez-Reagenz gefällt. Die in Lösung verbleibenden Störsubstanzen werden abdekantiert. Der Carrez-Niederschlag wird mit Tetrahydrofuran und Aceton extrahiert und photometrisch bestimmt. Zur exakten Analyse der Carotinoide wird der Extrakt mit der HPLC analysiert.